1. Cosa comprendono gli studi non clinici?
Risposta:Gli esperimenti non clinici includono studi di farmacologia, test di tossicità generale, esperimenti di tossicocinetica e farmacocinetica non clinica, test di tossicità riproduttiva, test di genotossicità, cancerogenicità e altri test (fototossicità, dipendenza, immunotossicità), ecc. In caso di terapia di combinazione, possono essere condotti anche studi non clinici sulla sicurezza della terapia di combinazione. Per alcune proporzioni elevate (maggiore del 10% dell'esposizione sistemica totale e il livello di esposizione negli studi sugli animali è inferiore all'esposizione umana), potrebbe essere necessario condurre studi non clinici sulla sicurezza dei metaboliti.
2. Qual è lo scopo della valutazione preclinica della sicurezza?
Risposta:Lo scopo della valutazione preclinica della sicurezza include generalmente il chiarimento delle caratteristiche della reazione di tossicità correlata agli organi bersaglio, alla dipendenza dalla dose, alla relazione di esposizione e alla potenziale reversibilità. Queste informazioni possono essere utilizzate per stimare la dose iniziale sicura e l’intervallo di dosaggio per gli studi clinici sull’uomo (come menzionato in precedenza, il NOAEL deve essere ottenuto negli esperimenti tossicologici per calcolare la MRSD, la dose iniziale massima raccomandata) e per determinare gli indicatori di monitoraggio clinico per potenziali reazioni avverse.
3. Quali studi non clinici sono necessari per i primi-sperimentazioni-sull'uomo?
Risposta:Per questa domanda è innanzitutto necessario chiarire la tipologia del farmaco. ICH M3 (R2) è applicabile a situazioni comuni nello sviluppo di farmaci e fornisce principi guida generali. Per i farmaci biologici, gli studi non clinici dovrebbero essere condotti secondo i requisiti di ICH S6.
⑴Farmacocinetica:Prima della presentazione dell'IND, sono sufficienti i dati sul metabolismo del prodotto sperimentale in diverse specie e i dati sul metabolismo in vitro nell'uomo, nonché sul tasso di legame con le proteine plasmatiche. Le informazioni su assorbimento, distribuzione, metabolismo in vivo ed escrezione dovrebbero essere completate prima degli studi clinici su larga-scala (solitamente fase 3). Gli esperimenti di assorbimento della PK vengono generalmente condotti su più specie prima della presentazione dell'IND e della determinazione del PCC per comprendere meglio le caratteristiche PK del farmaco nelle diverse specie, sebbene in questo caso non sia richiesto, il che è un po' strano.
⑵Farmacologia di sicurezza:La valutazione degli effetti sui sistemi cardiovascolare, nervoso centrale e respiratorio deve essere completata prima della presentazione dell'IND, che è una combinazione di test standard di sicurezza farmacologica. Se necessario, durante gli studi clinici possono essere condotti esperimenti farmacologici di sicurezza supplementari.
⑶Tossicità a dose ripetuta:In genere, viene organizzato un test di tossicità cronica a breve-termine in base allo schema di dosaggio precoce dell'IND. Se il periodo di dosaggio deve essere prolungato successivamente, è necessario un test di tossicità cronica a lungo termine-per supportarlo.
⑷Genotossicità:Con un costo relativamente basso, la combinazione di test di genotossicità può essere completata prima della presentazione all'IND.
⑸Cancerogenicità:I test di cancerogenicità dovrebbero essere completati prima dell’approvazione del farmaco.
⑹Tossicità riproduttiva:Le osservazioni e le valutazioni del sistema riproduttivo dovrebbero essere incluse nei test di tossicità a dosi ripetute prima della presentazione all'IND per valutare preliminarmente la tossicità riproduttiva, essendo sufficiente una contraccezione rigorosa negli studi clinici. Gli studi sulla tossicità riproduttiva di fase I/II dovrebbero essere completati prima degli studi clinici su larga-scala, mentre gli studi sulla tossicità riproduttiva di fase III dovrebbero essere completati prima dell'approvazione.
⑺Fototossicità:La valutazione della fototossicità deve essere completata prima della presentazione dell'IND. Se l'assorbenza molare è maggiore di 1000 M-1 cm-1, esiste un rischio di fototossicità e i test di fototossicità dovrebbero essere condotti prima di studi clinici su larga scala.
4. Come dovrebbero essere stabilite le dosi nei test tossicologici? Come dovrebbe essere selezionata la dose più alta?
Risposta:Facendo riferimento ai "Principi di guida tecnica per i test di tossicità a dosi ripetute di farmaci", "In linea di principio, le dosi elevate dovrebbero indurre evidenti reazioni tossiche negli animali, le dosi basse dovrebbero essere equivalenti o superiori alla dose efficace negli animali o all'uso clinico e le dosi medie dovrebbero essere stabilite tra dosi elevate e dosi basse in base al meccanismo tossico e alle caratteristiche per esaminare la relazione dose{0}}risposta della tossicità."
In pratica, considerando il costo elevato dei test tossicologici, condurre un test di determinazione dell'intervallo di dose (DRF) con alcuni primati non umani è il metodo più conveniente in termini di costi e di lavoro e che fa risparmiare manodopera. La dose per i test DRF dovrebbe inoltre essere ulteriormente fissata sulla base di studi preliminari sulla sicurezza condotti durante la determinazione iniziale del PCC e di studi farmacologici. Molte istituzioni ora conducono anche test di tossicità acuta insieme ai test DRF, che sono test non-GLP, come menzionato in M3 (R2), seguendo il principio 3R per ridurre l'uso di animali.
Per i gruppi a dosaggio basso, medio e alto, viene generalmente utilizzata una spaziatura di 2-3 volte. Nei test tossicologici formali, la situazione ideale è che il gruppo ad alto dosaggio possa dimostrare un’evidente tossicità e i gruppi a dosaggio basso o medio possano essere utilizzati come NOAEL.
Inoltre, per la selezione della dose più alta, M3 (R2) fornisce anche risposte standard. In termini semplici, la dose più alta in tossicologia dovrebbe essere la dose massima tollerata (MTD) o la dose massima fattibile (MFD, che può essere intesa come la dose massima che gli animali possono tollerare in base al prodotto e alle caratteristiche dell'animale), oppure dovrebbe raggiungere la saturazione dell'esposizione, o il livello di esposizione dovrebbe essere sufficientemente alto (raggiungendo 50 volte la dose clinica prevista). In generale, 1.000 mg/kg/giorno sono considerati sufficienti a meno che la dose clinica prevista non raggiunga 1 g/giorno e il livello di esposizione di 1.000 mg/kg non raggiunga 10 volte il livello di esposizione clinica, nel qual caso è necessario aumentare ulteriormente la dose fino a 10 volte il livello di esposizione clinica, o 2.000 mg/kg/giorno, o MFD.
5. Quali studi nella ricerca non clinica sulla sicurezza devono seguire la GLP e quali no?
Risposta:Non è necessario che gli studi farmacologici e farmacocinetici seguano la GLP, mentre gli studi di sicurezza farmacologica, genotossicità, tossicità riproduttiva e tossicità a dosi ripetute devono seguire la GLP.
6. Quanto durano gli studi preclinici sulla tossicità a dosi ripetute?
Risposta:I requisiti di durata per supportare la conduzione degli studi clinici e l’approvazione del mercato sono diversi e devono essere specifici per il periodo di dosaggio degli studi clinici. Ad esempio, per i pazienti affetti da sclerosi multipla, il periodo minimo previsto per la sperimentazione clinica è di due anni. Pertanto, quando si arruolano pazienti con sclerosi multipla negli studi clinici, è necessario uno studio sulla tossicità cronica di 6-mesi sui roditori e di 9-mesi sui non-roditori, che è sufficiente per supportare l'approvazione del mercato. Per i farmaci non-oncologici, viene generalmente utilizzato uno studio sulla tossicità cronica di 4 settimane per supportare un periodo di dosaggio non superiore a 4 settimane per i primi studi clinici sull'uomo.
7. Come scegliere gli animali da esperimento per la valutazione della sicurezza preclinica?
Risposta:In genere vengono utilizzati due tipi di animali: i roditori con i ratti sono la scelta preferita e i non-roditori con i cani Beagle la scelta preferita. Naturalmente, dovrebbero essere seguiti anche principi di analisi specifici-del prodotto. Per le piccole molecole, la selezione delle specie dovrebbe considerare principalmente le caratteristiche metaboliche del prodotto sperimentale in animali simili all'uomo. Si può fare riferimento al "Test di analisi e identificazione dei metaboliti dei prodotti sperimentali nei topi CD-1, nei ratti SD, nei cani Beagle, nelle scimmie Cynomolgus e nei microsomi epatici umani", selezionando specie con caratteristiche metaboliche simili a quelle umane, ovvero specie con quantità e tipi di metaboliti simili a quelli umani. Inoltre, le specie selezionate dovrebbero essere sensibili al prodotto sperimentale. Sulla base dell’esperienza passata, per un farmaco di piccole dimensioni, le sue caratteristiche metaboliche nei cani Beagle possono essere simili a quelle umane ma con una bassa esposizione.
