Test di immunogenicitàsono essenziali nello sviluppo clinico dei farmaci, in particolare per i prodotti bioterapeutici. Nonostante l'attenzione normativa sui requisiti clinici, la valutazione dell'immunogenicità non clinica rimane critica in circostanze specifiche. Secondo ICH S6, l'immunogenicità non clinica dovrebbe essere valutata quando vi è una significativa alterazione dell'attività farmacodinamica o quando l'esposizione al farmaco cambia senza marcatori farmacodinamici o indicatori di risposta immunomediata.
Consenso strategico minimo del Forum europeo di bioanalisi (EBF)
L'EBF ha istituito un gruppo di lavoro nel 2016, che ha portato a un consenso sulle strategie minime per la valutazione dell'immunogenicità non clinica. I parametri chiave includono la valutazione SCP, la sensibilità, la tolleranza al farmaco e la precisione:
1. Valori limite:Per le soglie di screening, si raccomanda un tasso di falsi positivi (FPR) del {{0}}.1-1% senza test di conferma. Un FPR dello 0,1% aiuta a escludere falsi positivi vicino al segnale SCP, rilevando efficacemente risposte immunitarie non cliniche rilevanti. Aderendo al principio 3R, l'SCP può essere determinato utilizzando meno campioni individuali, idealmente 15-30, generando 60 punti dati (ad esempio, 30 campioni analizzati due volte o 15 campioni analizzati quattro volte). La conferma FPR del campione pre-dosaggio non è necessaria a causa della sua limitata rilevanza non clinica.
2. Sensibilità:La sensibilità dovrebbe essere valutata all'interno di un singolo lotto di analisi. L'MRD dovrebbe idealmente essere inferiore a 100, con sensibilità inferiore a 1000 ng/mL. Secondo le linee guida NMPA 2021, la sensibilità dovrebbe raggiungere 250-500 ng/mL, con una sensibilità inferiore a -100 ng/mL preferibile se ottenibile. La concentrazione di LPC può essere impostata vicino a 2-3 volte il segnale SCP senza un'analisi statistica estesa.
3. Precisione:La precisione deve essere valutata su tre lotti di analisi, ciascuno comprendente sei set di controlli positivi preparati indipendentemente a tre livelli di concentrazione (HPC, MPC, LPC) e sei set di controlli negativi (NC).
4. Livelli di tolleranza al farmaco:La tolleranza al farmaco deve essere valutata ai livelli di LPC (o controllo positivo a 1000 ng/mL), assicurando che il metodo sia in grado di rilevare l'ADA ai livelli di farmaco previsti negli studi non clinici.
I parametri di convalida opzionali includono selettività, specificità, titoli e stabilità, personalizzati in base alle esigenze del singolo progetto.
Affrontare le sfide del settore
La "strategia minima" affronta sfide pratiche di implementazione, in particolare a causa della dipendenza di lunga data del settore dalle linee guida cliniche per gli studi di immunogenicità non clinici. Ad esempio, il settore esita spesso ad adottare strategie come "screening solo con un 0.1-1% FPR senza test di conferma". Tuttavia, definire valori di cut-off, sensibilità, tolleranza al farmaco e precisione rimane cruciale.
Raccomandazioni per i test di immunogenicità non clinici
Data la riconosciuta mancanza di traducibilità tra dati clinici e non clinici, l'EBF consiglia quanto segue:
1. Valutazione caso per caso:Le valutazioni non cliniche degli anticorpi anti-farmaco (ADA) dovrebbero basarsi su motivazioni scientifiche e sull'utilità dei dati, anziché essere un requisito predefinito.
2. Studi farmacocinetici/farmacodinamici (PK/PD):Questi studi, condotti prima della tossicologia GLP, possono fornire informazioni sulle risposte immunitarie, ma hanno un valore limitato.
3. Studi tossicologici:L'obiettivo primario è dimostrare un'esposizione sufficiente e valutare le patologie risultanti e la loro reversibilità, definendo livelli di non effetto e margini di sicurezza per l'uso clinico. L'ADA può o meno avere un impatto su TK/PD o causare patologie osservate.
4. Processo decisionale:La probabilità di generare una risposta immunitaria in vivo dovrebbe guidare le attività di sviluppo del test, bilanciando i rischi aziendali e le tempistiche degli sponsor.
Approcci strategici all'immunogenicità:
- Conservare i campioni e sviluppare/convalidare i test solo se si osservano impatti su TK/PD e sicurezza.
- Sviluppare test e avviare la convalida/i test sugli impatti osservati su TK/PD e sicurezza.
- Sviluppare e convalidare in modo proattivo i test in base ai rischi e alle risorse aziendali.
Per la convalida del test può essere adottato un approccio snello, evitando tutti i requisiti dei test clinici e applicando i principi 3R. I test di screening con punti di taglio rigorosi (0.1-1% FPR) o approcci segnale/rumore possono essere sufficienti per l'analisi del campione.
Adottando queste strategie ottimizzate, la valutazione dell'immunogenicità non clinica può diventare più efficiente e allineata alle aspettative scientifiche e normative, migliorando in ultima analisi lo sviluppo di prodotti bioterapeutici.
Parole chiave:
Test di immunogenicità
Immunogenicità non clinica
Anticorpi anti-farmaco (ADA)
Farmacocinetica (PK)
Farmacodinamica (DP)
Tossicologia
Sensibilità
Precisione
Forum europeo di bioanalisi (EBF)
Linee guida ICH S6
